CyQuantiFluor™细胞活力检测试剂盒检测原理详解
一、整体检测机制
CyQuantiFluor™依托双染料协同作用实现活细胞 DNA 特异性定量，为免裂解均相荧光检测体系，全程不依赖细胞生理代谢水平，仅依靠细胞膜完整性区分活 / 死细胞，从源头规避 ATP、胞内酶活波动带来的数据偏差。整套试剂混合后一步加样孵育即可读数，无需洗板、细胞裂解处理。
二、两种染料分工原理
DNA 特异性结合染料该染料具备细胞膜穿透性，可自由穿过结构完整的活细胞膜，靶向进入细胞核，与基因组 DNA 特异性结合后荧光信号大幅增强，荧光强度和活细胞内 DNA 总量呈线性正比；游离未结合 DNA 的染料仅产生微弱本底荧光，不干扰读数。死细胞细胞膜破损，染料虽可进入，但配套屏蔽染料会消除其荧光。
背景屏蔽染料无法穿透完整活细胞膜，不会干扰活细胞荧光信号；专一结合死细胞裂解释放的游离 DNA、体系胞外游离 DNA，淬灭该部分 DNA 结合染料产生的杂荧光，彻底屏蔽死细胞、碎片 DNA 造成的背景干扰，最终仪器检出信号只来源于活细胞，保证检测特异性。
三、产品技术优势原理
- 无代谢依赖：不检测 ATP、胞内蛋白酶活性，不受药物损伤线粒体、细胞休眠低代谢等因素影响，杜绝假阴 / 假阳性；
- 均相一步法：染料预混配置，仅需加样孵育，省去裂解、洗涤步骤，降低人工操作误差；
- 高信噪比：双染料双重控背景，空白本底极低，孵育 1~6h 荧光线性稳定，适配 96/384 孔高通量药物筛选。
四、应用逻辑
依托 DNA 定量的精准性，适用于肿瘤细胞增殖定量、候选化合物高通量毒理筛选、药物体外安全性评价、活细胞生长动态监测，是替代传统 CTG、CTF 代谢类试剂盒的优选方案。