一、基础信息
- 中文名称:N 端生物素修饰甲硫氨酸脑啡肽(Met - 脑啡肽)
- 英文全称:Biotinyl-Met-Enkephalin
- 三字母序列:Biotin-Tyr-Gly-Gly-Phe-Met
- 单字母简写:Bio-YGGFM
- 氨基酸总数:5 aa
- 分子式:C27H35N5O7S
- 分子量:573.67
- 结构修饰说明:
- N 端共价修饰生物素(Biotin / Bio,生物素酰基);
- 线性短肽,C 端游离羧基,无酰胺、环化、二硫键、焦谷氨酸、乙酰侧链修饰;
- 无额外侧链标记。
- 结构式:
二、理化性质
1.紫外定量:含 Tyr、Phe、Met,280 nm 紫外吸收明显,可直接紫外分光光度法测浓度。
2.稳定性要点
- 含 Met,极易氧化失活;溶解、分装全程冰浴,减少空气敞口时间;长期冻干粉分装充氮气隔氧保存;
- Tyr、Phe 为光敏残基,配液、储存全程避光;
- 无 Pro,肽链高度柔性;仅 N 端生物素封闭氨基端,C 端游离,易被羧肽酶、内肽酶降解,工作液建议现配现用。
3.酸碱特性
无酸性氨基酸,仅末端 Met 中性,整体近中性;适配 pH 6.0–7.6 PBS、神经元培养液、脑脊液模拟缓冲液。
4.溶解性
小分子短肽,亲水骨架,水溶性极佳,中性缓冲液常温完全溶解。
5.空间构象
柔性五肽,YGGFM 为 μ、δ 阿片受体核心识别序列;N 端生物素远离受体结合口袋,不干扰多肽与阿片受体结合亲和力。
三、来源背景
Met - 脑啡肽是内源性阿片肽,广泛分布于中枢、外周神经组织;N 端偶联生物素制成亲和探针,用于阿片受体互作、竞争性结合、Pull-down 实验。
四、生物学功能
- 高亲和力激动 δ 阿片受体,中度结合 μ 受体,弱结合 κ 受体;
- 中枢介导镇痛、调节情绪、奖赏通路、抑制神经递质释放;
- 外周调控肠道蠕动、免疫细胞活性;
- 生物素标签特异性结合链霉亲和素树脂,富集细胞膜阿片受体及其相互作用蛋白。
五、科研应用
- Pull-down 亲和富集 δ/μ 阿片受体及下游结合蛋白;
- 阿片受体激动剂、拮抗剂体外竞争性结合筛选;
- 神经镇痛、成瘾相关神经元体外模型;
- Met - 脑啡肽 / Leu - 脑啡肽构效对比实验;
- 荧光 / 化学发光示踪阿片受体组织分布与内吞。
六、溶解与储存规范
- 溶解:pH7.2 无菌 PBS 冰浴避光配制,缩短敞口时间防止 Met 氧化;
- 冻干粉:短期 - 20 ℃避光密封;长期分装充氮气隔氧,-80 ℃避光储存;
- 工作液:单次分装避免反复冻融;2~8 ℃避光存放不超过 3~5 天。