一、基础信息
- 中文名称:生物素标记猪源胰抑素
- 英文名称:Biotinyl-Pancreastatin (porcine)
- 三字母序列:Biotin-Gly-Trp-Pro-Gln-Ala-Pro-Ala-Met-Asp-Gly-Ala-Gly-Lys-Thr-Gly-Ala-Glu-Glu-Ala-Gln-Pro-Pro-Glu-Gly-Lys-Gly-Ala-Arg-Glu-His-Ser-Arg-Gln-Glu-Glu-Glu-Glu-Glu-Thr-Ala-Gly-Ala-Pro-Gln-Gly-Leu-Phe-Arg-Gly-NH₂
- 单字母序列:Bio-GWPQAPAMDGAGKTGAEEAQPPEGKGAR EHSRQEEEEE TAGAPQGLFRG-NH₂
- 氨基酸总数:49 aa
- 分子式:C214H330N68O76S
- 分子量:5103.45
- 结构修饰说明:
- N 端修饰:Biotin(简写 Bio,生物素酰基);
- C 端酰胺化 -NH₂,封闭羧基末端;
- 无焦谷氨酸、二硫键、环化、乙酰、侧链定点修饰。
- 结构式:
二、理化性质
1.紫外定量:含 Trp、Met、Phe,280 nm 紫外吸收极强,可直接紫外分光光度法定量。
2.稳定性重点
- 含 Met,极易氧化失活;溶解、分装全程冰浴,冻干粉长期保存需充氮气隔氧;
- Trp、Phe 均为强光敏残基,全部操作、储存全程避光;
- 序列富含 Pro 形成多处刚性脯氨酸转角;N 端生物素、C 端酰胺两端封闭,显著抵抗氨基肽酶 / 羧肽酶;长链多肽易被内肽酶剪切,工作液现配现用。
3.酸碱特性
大量酸性 Glu、Asp;碱性 Lys、Arg、His;整体呈强酸性;适配 pH 6.0–7.4 PBS、猪胰岛细胞培养液、猪血浆缓冲体系。
4.溶解性
Gln、Thr、Ser 亲水残基搭配大量带电氨基酸,水溶性良好,中性缓冲液常温可完全溶解。
5.空间构象
多 Pro 分割成多段柔性结构,无稳定长 α 螺旋;N 端生物素不干扰多肽与胰岛膜受体、结合蛋白相互作用,适合亲和捕获实验。
三、来源背景
猪源胰抑素(Pancreastatin),由嗜铬粒蛋白 A 水解生成,胰岛内分泌关键调节肽;N 端偶联生物素作为亲和探针,用于猪胰岛、胰腺相关体外机制研究。
四、生物学功能
- 强效抑制胰岛素、胰高血糖素、胰腺外分泌酶释放;
- 抑制胆囊收缩、胃肠激素分泌,调节消化代谢;
- 调控交感神经、肾上腺髓质儿茶酚胺释放;
- 生物素标签可结合链霉亲和素树脂,Pull-down 富集靶受体与互作蛋白。
五、科研应用
- 猪原代胰岛细胞 Pull-down,筛选胰抑素结合膜蛋白;
- 胰岛激素分泌抑制体外模型,筛选降糖 / 促胰岛素分泌小分子;
- 胰腺内分泌、神经内分泌通路机制研究;
- 不同物种 Pancreastatin 序列功能对比实验;
- 荧光示踪、竞争性受体结合实验。
六、溶解与储存规范
- 溶解:pH7.2 无菌 PBS 冰浴避光配制,缩短敞口时间防止 Met 氧化;
- 冻干粉:短期 - 20 ℃避光密封;长期分装充氮气隔氧,-80 ℃避光储存;
- 工作液:单次分装避免反复冻融;2~8 ℃避光存放不超过 3–5 天。