一、基础信息
- 中文名称:猪源降钙素
- 英文名称:Calcitonin (porcine)
- 三字母序列:Cys-Ser-Asn-Leu-Ser-Thr-Cys-Val-Leu-Ser-Ala-Tyr-Trp-Arg-Asn-Leu-Asn-Asn-Phe-His-Arg-Phe-Ser-Gly-Met-Gly-Phe-Gly-Pro-Glu-Thr-Pro-NH₂
- 单字母序列:CSNLSTCVLSAYWRNLNNFHRFSGMGFGPETP-NH₂
- 氨基酸数量:32 aa
- 分子式:C159H234N46O45S3
- 分子量:3606.08
- 结构修饰:
- 第 1 位 Cys 与第 7 位 Cys 形成分子内二硫键;
- C 端酰胺化 (-NH₂),N 端游离氨基;
- 无 N 端乙酰、无额外修饰残基、无其他二硫键。
- 结构式:
二、理化性质
1.紫外定量:含 Tyr、Trp、Phe,280 nm 紫外吸收强,可直接紫外分光光度法测浓度。
2.稳定性
- 含 Met,易氧化失活;Trp/Tyr/Phe 均为强光敏残基,全程避光、减少空气接触;
- 存在分子内二硫键,体系严禁 DTT、β- 巯基乙醇等还原剂,否则环结构断裂、活性丧失;
- 序列含多处 Pro 形成刚性转角,C 端酰胺抵御羧肽酶切割,整体稳定性优于游离羧基线性肽;水溶液仍易被蛋白酶降解,建议现配现用。
3.酸碱特性:酸性 Glu,碱性 Arg、His,整体近中性偏弱碱性;pH 6.0–7.5 PBS、成骨 / 破骨细胞培养液、血清缓冲液中稳定。
4.溶解性:Ser、Thr、Asn、Gln 亲水残基丰富,水溶性优异,中性缓冲液常温可完全溶解。
5.空间构象:N 端 Cys1-Cys7 二硫键形成特征六元环,中段疏水螺旋、C 端柔性区段;闭环结构是受体结合、抑制骨吸收的必需构象。
三、来源背景
猪甲状腺滤泡旁细胞天然分泌降钙素,常与鲑鱼降钙素、人降钙素做物种间活性对比;对哺乳动物降钙素受体有中等亲和力,多用于猪源动物模型、降钙素受体构效关系研究。
四、生物学功能
- 强效抑制破骨细胞分化与骨吸收,降低血钙、血磷水平。
- 作用肾脏,轻度促进钙磷排泄,协同维持机体钙稳态。
- 具备外周与中枢镇痛效果,缓解骨损伤、高钙相关疼痛。
- 调控成骨细胞活性,参与骨骼重塑平衡。
五、科研应用
- 骨代谢体外模型:破骨细胞骨吸收实验、钙释放检测,与鲑降钙素做活性对照。
- 小型猪骨质疏松、高钙血症体内药理模型。
- 降钙素受体结合实验:比较不同物种降钙素的受体亲和力差异。
- 多肽构效研究:验证二硫键环、C 端酰胺、芳香氨基酸对生物活性的影响。
- 骨肿瘤、骨痛相关镇痛机制研究。
六、溶解与储存规范
- 溶解:pH7.2 无菌 PBS 冰浴避光配制,体系禁止添加任何还原剂。
- 冻干粉:短期 - 20 ℃避光密封保存;长期分装充氮气隔氧,-80 ℃储存。
- 工作液:单次分装,严禁反复冻融;2~8 ℃避光密封存放不超过 3 天。